武汉思特进公司(多图)-原位杂交仪制造厂家
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精3确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
原位杂交技术(in situ hybridization,ish)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。
原位pcr;原位杂交细胞定位和pcr的高灵敏度相结合的技术,在细胞(爬片、甩片或涂片)或组织(石蜡、冰冻切片)上直接对靶*片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。
原位杂交是指;分子杂交的一种形式。由未经抽提分离的染色体dna,在原来位置上被变性成单链后,与探针进行分子杂交。1977年由本顿(w.d.be*n)和戴维斯(r.w.d*is)在原分子杂交基础上发展的一种较新的分子杂交技术。方法是将菌落或噬菌斑转移到硝9酸纤维素滤膜上,使在原位发生溶菌后变性的dna,同滤膜原位结合,再与有放5射性同位素标记的特定核苷酸“探针”杂交,其结果可用放5射自显影来显示,出现银粒的地方便是待测染色体dna上与探针互补顺序所在的位置。对快速检测转化群落中的dna序列或任何一种插入的dna序列,以及动植物的*定位工作,都具有广泛应用价值。(见“分子杂交”、“放5射自显影”、“影印培养技术”)
根据不同的杂交实验要求,应选择不同的核酸探针。在大多数情况下,可以选择克0隆的dna或cdna双链探针。但是在有些情况下,必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和rna探针。例如,在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸探针,在检测单链靶序列时应选用与其互补的dna单链探针(通过克0隆人m13噬菌体dna获得)或rna探针,寡核苷酸探针也可。长的双链dna探针特异性较强,适宜检测复杂的靶核苷酸序列和病原体 ,原位杂交仪制造厂家,但不适宜于组织原位杂交,因为它不易透过细胞膜进入胞内或核内。在这种情况下,寡核苷酸探针和短的pcr标记探针(80~150bp)具有较大的优越性。
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