蛋白质折叠*盒-友名生物(图)

微量凯氏（kjeldahl）定氮法
样品与浓1*共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与*作用，变成*氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：
nh2 ch2 cooh 3h2 so4 ――2co2 3so2 4h2o nh3 (1)
2nh3 h2 so4 ――(nh4 )2 so4 (2)
(nh4 )2 so4 2naoh――2h2 o na2 so4 2nh3 (3)
反应（1）、(2)在凯氏瓶内完成，反应（3）在凯氏蒸馏装置中进行。为了加速消化，可以加入cuso4作催化剂，k2so4以提高溶液的沸点。收集氨可用*溶液，滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。计算所得结果为样品总氮量，如欲求得样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6．25即得。
原子数由m个氨基酸，n条肽链组成的蛋白质分子，至少含有n个—cooh，至少含有n个—nh2，肽键m-n个，蛋白质折叠*盒，o原子m n个。分子质量设氨基酸的平均相对分子质量为a，含b个二硫键，蛋白质的相对分子质量=ma-18(m-n)-2b*控制*中的核苷酸 6信使rna中的核苷酸 3蛋白质中氨基酸 1。蛋白质是由c（碳）、h（氢）、o（氧）、n（氮）组成，一般蛋白质可能还会含有p（磷）、s（硫）、fe（铁）、zn（锌）、cu（铜）、b（硼）、mn（锰）、i（碘）、mo（钼）等。这些元素在蛋白质中的组成百分比约为：碳50% 氢7% 氧23% 氮16% 硫0~3% 其他微量。
（1）一切蛋白质都含氮元素，且各种蛋白质的含氮量很接近，均为16%；
（2）蛋白质系数：任何生物样品中每1g元氮的存在，就表示大约有100/16=6.25g蛋白质的存在， 6.25常称为蛋白质常数。
蛋白质含量测定方法之双缩脲法（biuret法）
实验原理双缩脲（nh3conhconh3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：*铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。
此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分准确的蛋白质测定。
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