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当dna聚合酶 iii沿着滞后链模板移动时,*组步移,由特异的引发酶催化合成的rna引物即可以由dna聚合酶 iii所延伸,合成dna。当合成的dna链到达*次合成的冈崎片段的位置时,滞后链模板及刚合成的冈崎片段从dna聚合酶 iii上释放出来。由于copy叉继续向前运动,便又产生了一段单链的滞后链模板,它重新环绕dna聚合酶 iii,通过dna聚合酶iii开始合成新的滞后链冈崎片段。通过这种机制,前导链的合成不会超过滞后链太多,这样引发体在dna链上和dna聚合酶 iii以同一速度移动。在copy叉附近,形成了以dna聚合酶 iii二聚体、引发体和解旋酶构成的类似核糖体大小的以物理方式结合成的复合体,称为dna copy体。copy体在dna前导链模板和滞后链模板上移动时便合成了连续的dna前导链,以及由许多冈崎片段组成的滞后链。当冈崎片段形成后,dna聚合酶i通过其 5→3外切酶活性切除冈崎片段上的rna引物,并利用后一个冈崎片段作为引物由 5→3合成dna填补缺口。*后由dna连接酶将冈崎片段连接起来,形成完整的dna滞后链。
遗传控制中大的困难并不是dna的,而是需要被的特异dna段的分离 [2] 。如果以*为目的,特异dna段的分离将大大有助于获得与遗传信息同样多的相关的*产物,一般说这些*产物均为蛋白质多肽,因此*该蛋白质的对于测定和沉淀蛋白质及其前体有重要用途,甚至可用于了解蛋白质分子量 [2] 。amv反转录酶和mlv反转录酶都必须有引物来起始dna的合成。cdna合成的引物是与真核细胞mrna分子3’端poly(a)结合的12~18个核苷酸长的oligo(dt)。
dna连接酶与dna聚合酶的区别?
形成方式不同
dna连接酶是在两个dna部分片段之间形成*二酯键,不是在单个核苷酸与dna部分片段之间形成*二酯键。dna连接酶都不能催化两条游离的dna链相连接。
dna聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的dna1片段上,形成*二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用,催化原来的dna进行复1制,然后将原来的dna和复1制以后的dna进行模板配对后,连接聚合在一起,就可以形成新的dna链。
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