定量反转录*盒-武汉友名生物

原位pcr仪
它是由主机,加热模块,玻片,定量反转录*盒,热盖,控制软件组成。主要是应用对细胞或组织内的dna部分片段进行原位扩增分析-即定位分析,如病源*在细胞的位置或目的*在细胞内的作用位置等。是保持细胞或组织的完整性,使pcr反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶dna所在的位置上进行*扩增,不但可以检测到靶dna,又能标出靶序列在细胞内的位置,于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值。它无需将细胞*碎提取dna,细胞内有dna酶的作用扩增受到一定的影响,使用不是很普遍。
该仪器主要应用于医学临床研究,如*细胞等。
随机引物扩增技术(arbitrary primedpcr, ap- pcr)
ap-pcr技术通过随意设计或选择一个非特异性引物.在pcr反应体系中.首先在不严格条件下使引物与模板中许多序列通过错配而复性。如果在两条单链上相距一定距离有反向复性引物存在,则可经taq酶的作用使引物延伸而发生dna部分片段的扩增。经一至数轮不严格条件下的pcr循环后,再于严格条件下进行扩增。扩增的产物经dna测序凝胶电泳分离后.经放1射性自显影或荧光显示即可得到dna*图。ap-pcr用于肿1瘤的**、**的分离;菌1种、菌株及不同物种的鉴定;遗传作图;不同分化程度或某些不同状态下的组织的*表达差异等方面的研究。
pcr的创建
khorana (1971)等*早提出核酸体外扩增的设想:“经dna变性,与合适的引物杂交,用dna聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可合成trna*。”但由于当时*序列分析方法尚未成熟,热稳定dna聚合酶尚未报道以及引物合成的困难,这种想法似乎没有实际意义。加上分子克1隆技术的出现提供了一种克1隆和扩增*的途径,所以khorana的设想被人们遗忘了。
1983年4月的一个星期五晚上,他开车去乡下别墅的路上,猛然闪现出“多聚酶链式反应”的想法。
1983年12月,mullis用同位素标记法看到了10个循环后的49 bp长度的第yi个pcr片段;
1985年,kary mullis在cetus公司工作期间,发明了pcr。mullis要合成dna引物来进行测序工作,却常为没有足够多的模板dna而烦恼。
1985年10月25日申请了pcr的专1利,
1987年7月28日批准(专1利号4,683,202 ),mullis是第yi个发明人;
1985年12月20日在science杂志上发表了第yi篇pcr的学术论1文,mullis是共同作者;
1986年5月,mullis在冷泉港实验室做专题报告,全世界从此开始学习pcr的方法。
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