探针法M.haemobos实时定量PCR试剂盒

探针法candidatus mycoplasma haemobos实时定量pcr试剂盒
probe-quantitative real-time pcr kit for candidatus mycoplasma haemobos
货号：mqt-hbo-20 规格：20个反应
货号：mqt-hbo-50 规格：50个反应
货号：mqt-hbo-100 规格：100个反应
储存：-20度，避光保存，有效期一年。避免反复冻融。
试剂盒特点：
本试剂盒可以特异性检测candidatus mycoplasma haemobos，不受其他基因组干扰。 本试剂盒灵敏度高，反应液中仅1个基因组时检出率为69%。线性范围跨越8个数量级。 本试剂盒使用的dna聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。 本试剂盒带有阳性对照样品（组分c），可用于检验试剂盒有效性。 带有udg酶和dutp，可降低残留dna的污染。
嗜血支原体（hemotropic mycoplasma，或hemoplasma)是一类寄生于红细胞表面的细菌，无细胞壁，可以感染很多哺乳动物，包括猫、犬、猪、牛、羊等，也包括人类。嗜血支原体曾被命名为血巴通氏体（hemobartonella）和附红细胞体（eperythrozoon），根据16s rrna基因序列分析，被重新归类为支原体。在牛体内已发现的嗜血支原体有两种：维容氏支原体（mycoplasma wenyonii）和candidatus mycoplasma haemobos。
candidatus mycoplasma haemobos发现较晚，直至本世纪才有报导，分布较为广泛，在中国、日本、瑞士、德国和巴西等都有发现，临床症状尚不清楚。其16s rrna基因较维容氏支原体短，相似度仅81.2%，与猫血支原体有95%的相似度，因而在分类上与猫血支原体更为接近。
candidatus mycoplasma haemobos尚无合适的体外培养方法，因此难以开发蛋白类检测方法。检测方法一般采用吉姆萨染色的血涂片法。血涂片法的检测灵敏度和特异性均比较差，容易受到人工制片方法和血液里其他成分的干扰，且支原体易从红细胞表面脱落，造成漏检。而pcr法在灵敏度上则有明显的优势，且可以区分支原体种类。定量pcr法与普通pcr法相比，不仅可以精确定量，而且操作更为方便，更少受环境污染的影响。
本试剂盒基于16s rrna基因的保守区域，设计特异性引物和探针，可以准确识别candidatus mycoplasma haemobos，与其他生物基因组无交叉反应。经检测，本试剂盒与维容氏支原体、猫和犬的3种嗜血支原体、及4种非嗜血支原体均无交叉反应。
本试剂盒包含热启动dna聚合酶、dntp（以dutp代替dttp）、引物、探针、阳性对照品、rox染料，和用以防止残余dna污染的udg（uracil-dnaglycosylase，尿嘧啶-dna-糖基酶），用户只需准备好dna样品即可使用。
本试剂盒采用的dna聚合酶源自极端嗜热菌（thermus thermophilus），经改造后较普通的taq酶具有更强的抗抑制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体，在室温下dna聚合酶活性被抑制。在pcr循环的热变性阶段，抗体受热被去除，此时dna聚合酶活性恢复，因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余dna的污染，提高pcr扩增效率、灵敏度和目的片段产量。
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