射频功率放大器在**细胞表面EGFR研究中的应用

实验名称：超声激卟啉对s180**细胞表面egfr表达量的影响
研究方向：生物医疗
测试目的：
血卟啉是从血红蛋白中提取的**光敏剂，其本身无效应，但它可以在动物和人的多种**组织**聚集，易为声光辐射处理，当它被声光后能产生强烈的效应。美国利用光，这种方法被称为光动力学疗法，简称pdt。光动力学疗法在临床主要应用于人体表面浅层的**。光在生物组织中的穿透能力差，使其对深部的**受到限制。超声联合血卟啉对小鼠移植**生长抑制有协同效应，发现单用血卟啉无抑制作用，单用超声仅有轻微抑制作用，而两者联合则有明显的抑制效果，并将之命名为声动力学疗法。超声是一种弹性机械波，其在生物组织中的穿透能力比激光强，同时超声能够聚焦于特定部位。声动力疗法对于**细胞有较强的针对性，对正常组织，组织穿透力强，并且机体不产生耐受性，可以反复多次**，因而它对于**，特别是组织深层**有着较好的应用前景。有学者认为sdt或细胞的部分机理是通过超声的热效应来实现的，但是大量的实验结果提示，sdt可能较主要地与超声聚集在癌组织的血卟啉产生单线态氧有关。
测试设备：ata-8202射频功率放大器、昆明系小白鼠、艾氏腹水**细胞系、超声探头、血卟啉衍生物为单羟乙基单次卟啉、细胞色素c和bax单抗体、caspase-3单抗体、链霉卵白素sp试剂盒。
实验过程：
接种：s180腹水瘤细胞于6只小鼠腹腔1周后，随机取3只小鼠，抽取腹水细胞，分别置于医用薄壁试管，加入rpmi1640+10%小牛培养基中，于37℃孵箱培养，实验时用生理盐水调整细胞浓度至2x106个/ml。每只小鼠抽取的腹水细胞分为12管，分为四组，分别为对照组(ct)、血卟啉组(h)、超声组(u)和超声加血卟啉组(uh)，每组三管，每管0.5ml细胞悬液。h组和uh组每管中加入血卟啉4ul，使其终浓度为0.01mg/ml，37℃co2孵箱孵育，45min后u组和uh组分别在频率为1.8mhz，强度为2w/cm2的超声装置中声照处理3min，各实验组分别于声照后1h、3h、5h取材，常规细胞涂片。
*组织化学染色：以sp法进行*组织化学染色：细胞涂片固定后加3%处理15min，除去内源性酶pbs洗3次，加正常动物30min以减少非特异性染色，加egfr一抗4℃过夜，pbs代替一抗作为阴性对照。sp染色按试剂盒说明进行，dab显色，梯度酒精脱水，中性树胶封固盖片。
阳性结果观察：各组随机选取10个高倍视野，利用数码显微成像系统进行图像采集和分析。imagepro-plus5.0图像分析软件测定各组照片的平均光密度od值(0~255)(用平均光密度表示阳性细胞表达强度，平均光密度值越大则表达越强)。组间t检验显示组间差异。
实验结果：
由表中数据可以看出，超声激卟啉处理1h后，uh组、u组平均光密度值明显**ct组、h组，且uh组平均光密度值**u组，经组间t检验，uh组与其它组差异较显著(p<0.01)；超声激卟啉处理3h后，uh组平均光密度值小幅度下降，ct组、h组基本无变化，u组平均光密度下降。
表1egfr在超声处理1h、3h、5h后平均光密度值比较(*10-2)
图1egfr在超声处理1h、3h、5h后平均光密度值比较(*10-2)
安泰ata-8202射频功率放大器：
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