H9C2细胞系大鼠心肌细胞

一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠心肌细胞
细胞别称:h9c2[2-1]; h9c2 (2-1); h9c2; h9c2
细胞货号:snl-029
细胞种属:大鼠
生长情况:贴壁
培养条件:h-dmem+10%fbs+1%双抗
培养环境:air, 95%; carbon dioxide (co2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期 2-3天
培养基体积 t25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净t25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温pbs轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的pbs;
3.t25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方 92%fbs+8%dmso(新手建议)或92%完全培养基+8%dmso(高手建议);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1. 离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3. 将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

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