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洗脱和收集分析物(另一种情况是保留杂质而分析物通过柱子)
在反相萃取柱上，清洁溶剂为含有农业生产系统适当浓度的溶剂的水或缓冲液；
为确定清洗溶剂的浓度和体积，将试样加到 spe柱上，用5~10倍 spe柱体积的溶剂进行清洗，对流出液进行连续分析，得到清洗溶剂对分析物的洗脱曲线。按顺序*清洗溶剂强度，根据分析物在不同强度下的洗脱曲线，确定合适的清洗溶剂强度和体积；
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洗脱和收集目的：将分析物全部洗脱并以小体积级分方式收集分析物，同时在 spe柱上尽可能保留比分离物保留力更强的杂质；
收集的分析物级分可被氮气吹干，然后溶解在小体积溶剂中，以提高分析物的浓度，或调整溶剂性质以作后期分析。
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当发现回收率下降时，prs固相萃取柱选择，收集该组分，prs固相萃取柱类型，并检测目标化合物是否在这一阶段被洗脱。若经调整 ph使可离子化的目标化合物中性化，并通过疏水力被 spe柱吸附，则洗涤时应注意保持 ph不变，以免因 ph变化而导致目标化合物在洗涤过程中丢失。
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正压法通常是将带一定压力的空气或氮气从 spe柱上吹走填料中的水；负压法则是将一定真空度从萃柱下吹走残余的水。
单独样品处理，可使用一个通过适配器连接到 spe柱，推动样品或溶剂通过 spe柱管，如需500 mg或1 g的吸附剂柱床，可选用适配器直接与配合。自动 spe作业，由于其优良的结果重复性，已被广泛使用；96孔板的 spe装置也是一种理想的自动化方案。该方案适用于样品量大，开封prs固相萃取柱，需要快速处理的场合。
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洗涤剂和洗脱剂的优选
反相型和正相型洗脱液的洗脱强度应分别增加和降低，但对回收率无明显影响；
就反相模式而言，可先对目标化合物的水溶液上样，然后以5%、10%、20%、30%、40%、50%、70%、80%、90%、的甲1醇水溶液进行洗脱，prs固相萃取柱分类，分别收集洗脱液分析，建立淋洗曲线，确定目标化合物被洗脱时的溶剂体系，淋洗液中甲1醇的含量应略低于目标化合物正好被洗脱时的溶剂体系，而洗脱液中甲1醇的含量应略高于目标化合物正好被完全洗脱时的溶剂体系；当纯甲1醇无法洗脱目标化合物时，则应测试甲1醇-甲1基叔丁基1醚混合溶液的洗脱曲线；如果离子型化合物既不溶于水也不溶于甲1醇，则可在溶剂体系中添加酸或碱。
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净水系统
键合相位是非*性的，碰到水c18链就会被排斥，导致c18 “倒伏”，色谱峰变差，保留变弱，即水相位降，所以大多数c18反相分离柱不能用纯水作流动相。一般选用c18-aq反相柱分离亲水化合物，走水体系，提高保留值。
防腐盐
单独用酸或碱来调节流动相中的 ph值，由于分离成分的多样性，未必能达到实验所要求的效果。一般做法是：以缓冲盐制备流动相。但是有些缓冲盐会析出不易观察的微晶：过滤后，改变流动相的组成；不过滤时，晶体会损坏管柱，也容易堵塞管道，污染检测器。所以，在满足实验条件的情况下，尽量选择不容易析出的缓冲盐，分离结束后，一定要清洗柱子和整个分离系统，避免出现色谱性霉菌。为便于制备和处理，常选用挥发性盐类，如铵盐等。
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