Rab5C kit-武汉纽斯特生物技术

检测原理
武汉纽斯特生物技术有限公司的cd*2活性检测*盒主要是利用识别蛋白特异形态的cd*2-gtp单克l隆*l体特异性的去检测细胞提取物或者体外的（样品需要进行gtpγs活化处理）活性cd*2-gtp的水平。简言之，特异性识别cd*2活化构象的鼠单克l隆*l体可以特异性结合细胞裂解液中的cd*2-gtp活性蛋白，然后利用protein a/g将*原*l体的结合物吸附下来，再利用特异性识别cd*2活化构象的兔多克l隆*l体进行免l疫印迹分析进行检测。
武汉纽斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美国生命科学*供应商美国neweastbio在中国的子公司。美国neweastbio专注于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、elisa*盒、蛋白等。
悬浮细胞
1.培养细胞并根据需要用活化剂或*l剂刺激。
2.进行细胞计数，rab5c kit，然后通过离心沉淀细胞。
3.吸出培养基，并用冰冷的pbs洗涤两次。
4.完全除去pbs洗涤液，然后向细胞沉淀中加入冰冷的1x分析/裂解缓冲液
（每1 x 107池0.5 – 1 ml）。
5.通过重复移液裂解细胞。
6.将裂解物转移至适当大小的试管中，并置于冰上。
7.如果发生核裂解，则细胞裂解液可能变得非常粘稠，难以移液。如果这
发生时，裂解液可通过27?号注射l器针头3-4次以剪切
*组dna。
8.通过离心10分钟（在4°c下为12，000 x g）清除裂解物。
9.收集上清液并将样品保存在冰上以备立即使用，或速冻并保存在-
70°c以备将来使用。
阳性和阴性对照的体外gtpγs/ gdp蛋白质上样量
注意：体内刺激细胞会激l活大约10％的可用rab35，而
体外gtpγs蛋白负载将激l活近90％的rab35。
1.将0.5 ml每种细胞提取物等分到两个微量离心管中（或使用1 μg纯化的rab35蛋白）。
2.向每个试管中加入20 μl 0.5 m edta（至20 mm终浓度）。
3.将5 μl 100 xgtpγs（至100 μm，终浓度）加到一个试管中（阳性对照）。
4.在第二个试管中加入5 μl 100 x gdp（至1 mm，终浓度）（阴性对照）。
5.在搅拌下将试管在30°c孵育30分钟。
6.通过将试管放在冰上并添加32.5 μl 1 m mgcl2（至60 mm）。
当前没有直接测定法来测量arl1 gtpases的激l活。
neweast biosciences arl1激l活检测*盒基于特定于配置的单克l隆*l体，该*l体特异性识别arl1-gtp，但不能识别arl1-gdp。 鉴于单克l隆*l体对其*原的高度亲和力，可以在短时间内进行激l活测定。 该测定法可提供可靠的结果，并具有一致的可重复性。
rab5c kit-武汉纽斯特生物技术由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司为客户提供“g蛋白活性,camp和cgmp elisa*盒,蛋白点突变”等业务，公司拥有“纽斯特”等品牌，专注于生*工等行业。，在湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城b3-3栋3楼的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：乐经理。