友名生物技术-碱性*酶

所有合成cdna条链的方法都要用依赖于rna的dna聚合酶(反转录酶)来催化反应，主要有两个关键因素，一个是mrna模板，另一个是反转录酶 。商品化反转录酶有从禽类成髓细胞瘤病毒纯化到的禽类成髓细胞病毒（amv）逆转录酶和从表达化的moloney鼠病毒反转录酶*的大肠中分离到的鼠病毒（mlv）反转录酶。amv反转录酶包括2个具有若干种酶活性的多肽亚基，这些活性包括依赖于rna的dna合成，依赖于dna的dna合成以及对dna-rna杂交体的rna部分进行内切降解（rna酶h活性）。mlv反转录酶只有单个多肽亚基，兼备依赖于rna和依赖于dna的dna合成活性，但降解dna—rna杂交体中的rna的能力较弱。且其热稳定性较amv反转录酶差。mlv反转录酶能合成较长的edna（如大于2～3kb）。amv反转录酶和mi。v反转录酶利用rna模板合成cdna时的适ph、适盐浓度和适温度各不相同．所以合成链时相应调整条件是非常重要的。
t4 rna ligase主要用于rna和rna之间的连接，连接时需要5*基团和3羟基的存在。不仅可以进行rna分子间的连接，也可以进行rna分子(*短8个碱基)的环化连接。
t4 rna ligase可以用于rna和单核苷酸之间的连接，碱性*酶，单核苷酸必须为5和3均*化的形式，此时常用于rna的3末端标记。
t4 rna ligase也可以用于dna和rna之间的连接。当dna提供5*基团，rna提供3羟基时，连接效率较高；当dna提供3羟基，rna提供5*基团时，连接效率非常低。
t4 rna ligase也可以用于dna和dna之间的连接，但连接效率非常低。主要用于dna的环化连接，例如5 race中的cdna环化。dna和dna之间的连接尽管可以进行，但比较困难。
碱性*酶
*在怀孕，以及骨骼成长中遭受某种类型损伤后会将碱性*酶释放进血流。碱性*酶是一种由肝1脏产生的蛋白质并可以在所有*器1官中发现它。在儿童和青少年的骨骼成长过程中，骨头中的*酶数量相对较高。医生能通过血检了解碱性*酶，如果水平过高就说明存在一些健康问题。然而，碱性*酶只是帮助医生找出潜在原因的其中一个指数。
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